Módszer a kukorica peroxidáz-aktivitásának meghatározására
Eine in der Literator beschriebene spektrophotometrische kinetische Methode wurde zur Bestimmung der löslichen Peroxidase-Aktivität vom Mais adaptiert. Die die höchste Reaktionsgeschwindigkeit sichernde Substratkonzentration, ferner jener lineare Abschnitt des Zusammenhanges zwischen Extinktion und...
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| Szerzők: | |
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| Dokumentumtípus: | Cikk |
| Megjelent: |
Lapkiadó Vállalat
Budapest
1981
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| Sorozat: | Élelmiszervizsgálati közlemények
27 No. 3 |
| Kulcsszavak: | Élelmiszervizsgálat - analitikai kémia - módszer, Élelmiszerkémia - módszer |
| Tárgyszavak: | |
| Online Access: | http://acta.bibl.u-szeged.hu/80897 |
| Tartalmi kivonat: | Eine in der Literator beschriebene spektrophotometrische kinetische Methode wurde zur Bestimmung der löslichen Peroxidase-Aktivität vom Mais adaptiert. Die die höchste Reaktionsgeschwindigkeit sichernde Substratkonzentration, ferner jener lineare Abschnitt des Zusammenhanges zwischen Extinktion und Reaktionsperiode wurden festgestellt, deren Steile als Mass der Enzymaktivität dient. Die Wirkung der Enzymkonzentration und des pH-Wertes auf die Enzymaktivität wurde auch untersucht. Auf Grund der Untersuchungen die folgenden Reaktionsumständen erwiesen sich als geeignet zur Durchführung der Messung: 7,35 mM H20 2, 0,083% o-Phenylendiamin, 0,05 — 0,15% Enzymextrakt, pH 5,0 25°C, 0 —12 Minuten Reaktionsperiode. Eine Lösung von Natriummetabisulfit diente dabei zur Abstellung der Reaktion. Die Extinktion der Reaktionsgemische wurde gegen eine keinen Enzymextrakt enthaltende Blindprobe gemessen. Die Enzymaktivität wurde vom linearen Abschnitt des Zusammenhanges zwischen Extinktion und Reaktionsperiode mittels Regressionsberechnung ermittelt und auf 1 g Mais-Trockensubstanz bezogen (spezifische Aktivität). Jene Enzymaktivität wurde als Einheit betrachtet, durch welche eine Extinktionserhöhung von IO-3 /Minute hervorgerufen wurde. Die Methode ist gut reproduzierbar, die Streuung bezüglich des Durchschnittswertes ist weniger als +5%. Die Methode erwies sich als geeignet zur Unterscheidung der Werte der spezifischen Peroxidaseaktivität von Maismustern verschiedener Sorten und Jahrgängen, sowohl in ungetrocknetem wie auch in getrocknetem Zustand. A spectrophotometric kinetic method described in literature was adapted to the determination of the soluble peroxidase activity of maize. The substrate concentration yielding the highest reaction rate furthermore the linear section of the relationship between the extinction value and the reaction period were established, the slope of which section serves as a measure of enzyme activity. Also the effect of enzyme concentration and pH value on enzyme activity was investigated. On the basis of these investigations the following reaction conditions were found suitable for carrying out the measurement: 7,35 mM H20 2, 0,083% o-phenylene diamine, 0,05-0,15% enzyme extrpH 5,0, 25°C, 0 — 12 minutes of reaction period. A solution of sodium metabisulphite was used for stopping the reaction. The extinction of the reaction mixtures was measured against blanks containing no enzyme extracts. Enzyme activity was determined by regression calculation from the linear section of the relationship extinction —reaction period, and referred to one gram of dry substance of maize (specific activity). The enzyme was considered to have unit activity when it was able to induce an extinction increase of 10-3/minute. The method can be reproduced well, the scattering referred to the mean value is below +5%. The method proved suitable for distinguishing the values of the specific peroxidase activity of undried and dried maize samples of various species and of various years. |
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| Terjedelem/Fizikai jellemzők: | 147-154 |
| ISSN: | 0422-9576 |